IDENTIFICATION OF MEAT SPECIES IN SOME MEAT PRODUCTS IN ASSIUT CITY التعرف على أنواع اللحوم الموجودة في بعض منتجات اللحوم في مدينة أسيوط

Document Type : Original Article

Abstract

ABSTRACT:
Meat adulteration constitutes an important problem in Egypt. Adulteration of meat may occur by
substitution of low priced or even banned meat species for that high priced one. In this study, agar gel
immunodiffusion test (AGID) and polymerase chain reaction (PCR) techniques were applied for
detection of meat adulteration. Meat extract from beef, chicken, pork and donkey were prepared.
Hyperimmune sera were prepared in rabbits by subcutaneous injection of meat extracts and blood was
collected to get the specific antisera. Positive results indicated by appearance of clear precipitation
line between the antibody and the corresponding antigen with assurance that no cross reaction
occurred between species. Two hundred samples from beef meat products (50 minced meats, 50 raw
kofta, 50 sausages and 50 beef burger) were subjected to analysis by AGID technique. The incidence
of adulteration of minced meat with each of chicken and pork were 6%. The rate of adulteration was
34% and 26% in raw kofta, 32% and 14% in sausage and 32% and 2% in beef burger, respectively. Donkey
meat was detected only in beef burger at rate of 2%.
For application of PCR technique specific primers for chicken, pork and donkey meat species were
prepared; there molecular weights were 420, 343, and 350 bp, respectively. Deoxyribonucleic acid
(DNA) was extracted from tested samples for detection of the previous species in these tested
samples. Out of suspected and negative adulterated samples examined by AGID technique, fifty
samples were reanalyzed by PCR technique. By using PCR technique the adulteration rates with
chicken were 57%, 63.7%, 66.7% and 69% in minced meat, raw kofta, sausages and beef burger,
respectively. The adulteration rates with pork were 35.7%, 45.5%, 41.7% and 23% in minced meat, raw
kofta, sausages and beef burger, respectively. The adulteration rates with donkey meat were 7%, 18%,
8% and 7.7% in minced meat, raw kofta, sausages and beef burger, respectively.
صبح الغش التجاري بکافة أنواعه ظاهرة عالمية واسعة الانتشار تسـتحق الاهتمـام، ويعـد غـش اللحـوم واحـدا
والتدليس التجاري التي يتعرض لها المجتمع المصري في الآونة الأخيرة، وذلک لعمل منتجات رخيصة الثمن والذي أصـبح مشـکلة هامـة فـي
مصــر خاصــة مــع وجــود الــدخل المــنخفض وارتفــاع أســعار اللحــوم بشــکل ملحــوظ. يعــانى ســوق اللحــوم مــن ضــعف الرقابــة وانتشــار الغــش
والتلاعـب حيـث يمکـن أن يحـدث غـش اللحـوم باسـتبدال اللحـوم غاليـة الـثمن بلحـوم رخيصـة الـثمن أو ممنوعـة. وکـذلک يمکـن خلـط اللحـوم
الحمـراء بلحـوم رديئـة أو غيـر صـالحة للاسـتهلاک الآدمـي، وذلـک بخلطهــا مـع بعضـها الـبعض أو بفرمهـا وبيعهـا جـاهزة لعمـل بعـض أنــواع
المأکولات خاصة في الأسواق الشعبية التي تکثر فيها اللحوم رخيصة الثمن. وهذا النوع من الغش يسبب الکثيـر مـن الأمـراض مثـل العـدوى
بالأمراض البکتيرية أو الفيروسية.
تم في هذه الدراسة جمع عدد 200 عينة من منتجات اللحـم البقـرى مـن مدينـة أسـيوط خـلال عـام 2008م، وقـد احتـوت هـذه العينـات
على 50 عينة من کل من اللحم البقرى المفروم والکفتة النيئة والسجق البقرى والبيف بيرجر. وقد تم إجراء کل مـن اختبـار الترسـيب خـلال
الطبقة الجلاتينية واختبار البلمرة للتعرف على غش اللحوم ببروتينات حيوانية من أنواع أخرى.
لتطبيق اختبار الترسـيب فـي الطبقـة الجلاتينيـة تـم تحضـير محلـول ملحـي لخلاصـة اللحـوم لکـل مـن لحـوم البقـر، لحـوم الفـراخ، لحـوم
الخنازير ولحم الحمير. وتم تحضير الأمصال المضادة لهذه البروتينات بحقن الأرانب تحـت الجلـد بخلاصـة اللحـوم المختلفـة السـابق ذکرهـا.
◌ُ ثم تم نـزف الأرانـب وجمـع الـدم لفصـل الأمصـال المضـادة. تـم اختبـار الأمصـال والأمصـال المضـادة للتأکـد مـن خصوصـيتها وفعاليتهـا مـع
الترکيزات المختلفة. ظهرت النتيجة الايجابية في هذا الاختبار بوجود خط الترسيب الواضح بين المصـل المضـاد والمصـل المقابـل مـع التأکـد
من عدم وجود تداخل فى التفاعل بين الأنواع المختلفة.
تم تحليـل جميـع العينـات موضـع البحـث بـإجراء اختبـار الترسـيب خـلال الطبقـة الجلاتينيـة عليهـا. کـان معـدل الغـش فـى اللحـم البقـرى
المفروم بکل من الفراخ والخنزير 6٪ لکل منهما، وفـى الکفتـة النيئـة 26 ،٪34٪ ، فـى السـجق 14 ،٪32٪ وفـى البيـف برجـر 2 ،٪ 32٪
على الترتيب. أما لحم الحمير فقد وجد فقط في البيف برجر بنسبة 2٪.
لتطبيق اختبار البلمرة تم تحضير بادئات مخصصة لکل من لحوم الفراخ، الخنزير ولحـم الحميـر وکـان الـوزن الجزيئـي لهـم هـو 420،
350،343 زوج قاعدي على الترتيب. تم استخلاص الحمض النووي من العينات للتعرف على وجود الأنواع السابق ذکرها فى هذه العينـات
أم لا.
اختيرت خمسون عينة من العينات التي کانت نتائجها سلبية أو مشکوک فيها مع تطبيق اختبار الترسيب خلال الطبقة الجلاتينية لکي
يعــاد تحليلهــا باختبــار البلمــرة. وبتطبيــق اختبــار البلمــرة کــان معــدل الغــش بلحــوم الفــراخ بنســبة 69 ،٪66.7 ،٪63.7 ،٪57٪ فــى اللحــم
المفروم، الکفتة النيئة، السجق والبيف برجر على الترتيـب. کـان معـدل الغـش بلحـوم الخنـازير 23 ،٪41.7 ،٪45.5 ،٪35.7٪ فـى اللحـم
المفروم، الکفتة النيئة، السجق والبيف برجر علـى الترتيـب. کـان معـدل الغـش بلحـوم الحميـر 7.7 ،٪8 ،٪18 ،٪7٪ فـى اللحـم المفـروم،
الکفتة النيئة، السجق والبيف برجر على الترتيب.
يخلص البحث إلى التوعية بعدم شراء اللحوم المفرومة أو المصنعة حيث أنه يسهل خلطها مع نوعيات رديئة من اللحوم، وکذلک عـدم
ً تحـرک المسـئولين وجمعيـات
شراء اللحوم من مصـادر غيـر موثوقـة والابتعـاد عـن اللحـوم مجهولـة الهويـة. کمـا يؤکـد علـى أنـه أصـبح لزامـا
حمايـة المسـتهلک لضـبط حـالات الغـش والاسـتعانة بخبـراء الطـب البيطـري للتکييـف القـانوني لهـذه الحـالات والتطبيـق الحـازم لقـانون حمايـة
المستهلک.

REFERENCES:
Abd El-Nasser, M; Labieb, H.Y and Abd El￾Aziz M. Doaa (2010): Detection of native
and modified soybean in some meat
products in Assiut City, Egypt. Ass. Univ.
Bull. Environ. Res., 13, 1:27-34.
Ahmed M. M. M. and Abdel-Rahman S. M.
(2007): Application of species-specific
polymerase chain reaction and cytocrome
b gene for different meat species
authentication. Biotechnology, 6:426-430.
Ali, A. Wafaa (2008): Identification of some
animal species through examination of
fresh and frozen meat. M. V. Sc. thesis,
Department of Forensic medicine and
veterinary toxicology, Faculty of Vet.
Med., Assiut University, Egypt.
Appel T., Wolff M., Von Rheinbaben F., Heinzel
M. and Riesner D. (2001): Heat stability
of prion rods and recombinant prion
protein in water, lipid and lipid-water
mixtures. J. Gen. Virol. 82:465-473.
Ayaz Y., Ayaz N. D. and Erol I. (2006):
Detection of species in meat and meat
products using enzyme-linked
immunosorbent assay. J. Muscle Foods;
17: 214–220.
Beneke B. and Hagen M. (1998): Applicability
of PCR (Polymerase chain reaction) for
the detection of animal species in heated
meat products. Fleischwirtschaft, 78,
1016–1019.
Brown P., Liberski P.P., Wolff A. and Gajdusek
D.C. (1990): Resistance of scrapie
infectivity to steam autoclaving after
formaldehyde fixation and limited
survival after ashing at 360 degrees C:
Practical and theoretical implications. J.
Infect. Dis. 161(3): 467-472.
Canadian Council on Animal Care (2002):
Guidelines on Antibody Production,
Ottawa, Canada.
(www.ccac.ca/en/CCAC_Programs/Guide
lines_Policies/GDLINES/Antibody/
antibody.pdf).
Chemistry Center of Western Australia (1999):
Western Australian Food Monitoring
Program, Available from Department of
Health of Western Australia.
(http://www.population.health.wa.gov.au/
Environmental/Resources/Whats%20the
%20beef%20wit%20sausages.pdf).
Cordal de Bobbi M. E., Petracca A. and Moro
A. A. (1985): Preparation of reactants for
the detection of proteins from different
animal species by immunodiffusion. Rev
Argent Microbiol. 17(4): 209-16.
Cutrufelli M. E., Mageau R. P., Schwab B. and
Johnston R. W. (1993): Development of a
multispecies identification field test by
modified agar-gel immunodiffusion. J.
A.O.A.C. Int. 76(5):1022 - 1026.
El-Sangary R. A. and Gabrail G. M. (2006):
Differentiation between different animal
meats using species specific Polymerase
Chain Reaction technique. 12th Sci. Cong.
Fac. Vet. Med., Assiut Univ. Egypt.
El-Shewy E. A. (2007): Identification of meat
species in some "Ready to eat" meat
products sold in Egyptian markets. Zag.
Vet. J. 35, 2: 10-18.
Hitchcock C. H. S. and Crimes A. A. (1985):
Methodology for meat species identifyca￾tion: A review. Meat Sci. 15:215-224.
Hsieh Y. H. P., Wetzstein C. J. and Green N. R.
(1996): Retail pork products often
contain meats other than pork.
Highlights Agri. Res. 43.
Huang C. C. and Pan T. M. (2004): Detection of
genetically modified maize MON810 and
NK603 by multiplex and real-time
polymerase chain reaction methods. J.
Agric. Food Chem. 52: 3264–3268.
Huang C. C. and Pan T. M. (2005): Event￾specific real-time detection and
quantification of genetically modified
Roundup Ready soybean. J. Agric. Food
Chem. 53: 3833–3839.
Irani D. N. and Johnson R. T. (2003): Diagnosis
and prevention of bovine spongiform
encephalopathy and variant Creutzfeldt￾Jakob disease. Annu. Rev. Med., 54: 305-
319.
Kesmen Z., Sahin F. and Yetim H. (2007): PCR
assay for the identification of animal
species in cooked sausages. Meat science,
77: 649-653.
MAFF (1999): MAFF UK - Meat Speciation
Survey. No. 176. Available from Food
Standards Agency.
(http://archive.food.gov.uk/maff/archive/f
ood/infsheet/1999/no176/176meat. htm).
Odumeru J. (2003): Field application of protein
fingerprinting technology for assessment
of meat adulteration incidence in meat
processing plants and retail stores in
Ontario. Ontario Ministry of Agriculture
and Food. Enhanced Food Quality and
Safety Research Program.
Ong S. B., Zuraini M. I., Jurin W. G., Cheah Y.
K., Tunung R., Chai L. C., Haryani Y.,
Ghazali F. M. and Son R. (2007): Meat
molecular detection: Sensitivity of
polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism in species 
differentiation of meat from animal
origin. ASEAN Food Journal, 14: 51-59.
Reddy P. M., Reddy V. S. L., Rao Z. S. and
Murthy G. K. (2000): Identification of
origin of fresh, cooked, and decomposed
meats using brain antigens. J. Food Sci.
Technol., 37, 201–203.
Siklenka P., Fotta M., Korenekova B., Skalicka
M., Jackova A. and Kottferova J. (2004):
Detection of specific bovine protein in
heat processed meat products using
rabbit antiserum.. Bull. Vet. Inst. Pulawy
48: 277-281.
Taylor D. M., Fraser H., McConnell I., Brown
D. A., Brown K. L., Lamza K. A. and
Smith G. R. (1994): Decontamination
studies with the agents of bovine
spongiform encephalopathy and scrapie.
Arch. Virol. 139(3-4):313-326.
USDA-FSIS (2005): United States Department
of Agriculture-Food Safety and
Inspection Services; Identification of
Animal Species in Meat and Poultry
Products.
(www.fsis.usda.gov/ophs/Microlab/Mlg17
.02.pdf).
Wilesmith J. W., Wells G. A. H., Cranwell M. P.
and Ryan B.M.(1988): Bovine spongiform
encephalopathy: epidemiological studies.
Vet. Rec. 123:638-44.
Zeitler R., Pietsch K. and Waiblinger H. U.
(2002): Validation of real-time PCR
methods for the quantification of
transgenic contaminations in rape seed.
Eur. Food Res. Technol. 214: 346–351.